[実験プロトコル]
PEG沈
高分子量のポリエチレングリコールを添加して遠心すると、短いDNA(〜100bp)は沈殿させずに長いDNAのみを沈殿させることができる。これを利用してPCR後に短いDNAを除去する。ゲル切りやExoSAP-ITに比べて低コスト。
必要なもの
- 13% PEG + 1.6M NaCl溶液
- 70〜80%エタノール
- ミリQ 5〜20ul
- PCR産物
手順
- PCR産物に等量の13% PEG + 1.6M NaCl溶液を加えて氷上で1時間静置
- 20,000×g 4℃で30分間遠心
- プレート遠心機による排液
- 70〜80%エタノールをできるだけ多く加えて転倒混和
- 20,000×g 常温で10分間遠心
- プレート遠心機による排液
- 乾燥
- DNAをミリQに溶かす
最後のミリQ量はPCR産物の濃度に応じてテキトーに調節する。厳密にやるなら分光光度計を使う。
最終更新時間:2006年12月25日 10時57分35秒