[実験プロトコル]
仮
DNAzolによるDNA抽出
各種サンプル肉片からMolecular Research Center社のDNAzolを用いてDNAを抽出する。
必要なもの
- チューブ 1本 /sample
- DNAzol 45ul /sample
- 10mg/ml Proteinase-K 5ul /sample
- 100%エタノール 25ul /sample
- 70〜80%エタノール 500ul /sample
- ミリQ 50ul /sample
- サンプル肉片 適量
手順
- チューブにサンプル肉片とDNAzol 45ul + 10mg/ml Proteinase-K 5ulを入れてホモジェナイズ
- 60℃で1時間以上 or 56℃で1日以上 or 38℃で1週間以上インキュベート
- 100%エタノール25ul(半量)を加えて最大遠心加速度で遠心10分
- 上澄みを捨てて70〜80%エタノール 500ul以上加える
- 最大遠心加速度で遠心5分
- 上澄みを捨てて半日〜1日放置して乾燥
- ミリQ 50ulを加えて溶かし、冷蔵庫か冷凍庫へ入れて保管
タンパクの多いサンプルでは、エタ沈の前にクロロホルムを半量加えて攪拌+遠心し、上澄みを使う。
最終更新時間:2006年11月22日 21時54分15秒