トップ 差分 一覧 Farm ソース 検索 ヘルプ PDF RSS ログイン

DNAzolによるDNA抽出

[実験プロトコル]

DNAzolによるDNA抽出

 各種サンプル肉片からMolecular Research Center社のDNAzolを用いてDNAを抽出する。

必要なもの

  • チューブ 1本 /sample
  • DNAzol 45ul /sample
  • 10mg/ml Proteinase-K 5ul /sample
  • 100%エタノール 25ul /sample
  • 70〜80%エタノール 500ul /sample
  • ミリQ 50ul /sample
  • サンプル肉片 適量

手順

  1. チューブにサンプル肉片とDNAzol 45ul + 10mg/ml Proteinase-K 5ulを入れてホモジェナイズ
  2. 60℃で1時間以上 or 56℃で1日以上 or 38℃で1週間以上インキュベート
  3. 100%エタノール25ul(半量)を加えて最大遠心加速度で遠心10分
  4. 上澄みを捨てて70〜80%エタノール 500ul以上加える
  5. 最大遠心加速度で遠心5分
  6. 上澄みを捨てて半日〜1日放置して乾燥
  7. ミリQ 50ulを加えて溶かし、冷蔵庫か冷凍庫へ入れて保管

 タンパクの多いサンプルでは、エタ沈の前にクロロホルムを半量加えて攪拌+遠心し、上澄みを使う。

最終更新時間:2006年11月22日 21時54分15秒