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{{category 実験プロトコル}}
*PEG沈
高分子量のポリエチレングリコールを添加して遠心すると、短いDNA(〜100bp)は沈殿させずに長いDNAのみを沈殿させることができる。これを利用してPCR後に短いDNAを除去する。ゲル切りやExoSAP-ITに比べて低コスト。
*必要なもの
-[[13% PEG + 1.6M NaCl溶液]]
-70〜80%エタノール
-ミリQ
-ミリQ 5〜20ul
-PCR産物
*手順
+PCR産物に等量の13% PEG + 1.6M NaCl溶液を加えて氷上で15分間静置
+15,000rpm 4℃で20分間遠心
+上澄みを捨てる
+PCR産物に等量の13% PEG + 1.6M NaCl溶液を加えて氷上で1時間静置
+20,000×g 4℃で30分間遠心
+[[プレート遠心機による排液]]
+70〜80%エタノールをできるだけ多く加えて転倒混和
+15,000rpm 4℃で5分間遠心
+上澄みをギリギリまで吸い取り、半日〜1日放置して乾燥(or吸引乾燥)
+20,000×g 常温で10分間遠心
+[[プレート遠心機による排液]]
+乾燥
+DNAをミリQに溶かす
最後のミリQ量はPCR産物の濃度に応じてテキトーに調節する。厳密にやるなら分光光度計を使う。