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{{category 実験プロトコル}}
*AMPureXPによるサイズ選択
ゲル切りや高価な機材を用いず、磁気ビーズ溶液のみを用いて簡便なDNAのサイズ選択を行う。プライマーダイマーやdNTPの除去が行える。
*必要なもの
-8連チューブまたは96ウェルプレート 必要数
-AMPureXPまたは[[AMPureXPもどき]] 16uL
-70%エタノール 400uL
-PCR産物 20uL
-TEまたはSPW 40uL
*手順
+PCR産物 20uLに対して、転倒混和したAMPureXP溶液 16uLを加える(300bp以上を取る場合)
+ピペッティングを10回行う
+20℃5分インキュベート
+マグネットスタンドに立てて2分間静置する
+ビーズに触れないよう注意して溶液をチップで吸い取る
+マグネットスタンドに立てたまま、70%エタノール 200uLを加える
+30秒静置してからエタノールを除く
+マグネットスタンドに立てたまま、70%エタノール 200uLを加える
+30秒静置してからエタノールを除く(できるだけ除去)
+数分間風乾し(やりすぎるとビーズが割れるので注意)、マグネットスタンドから外してTEまたはSPW 40uLを加える
+ピペッティングを10回行う
+マグネットスタンドに立てて1分間静置する
+溶液を回収してラベルを振っておいた別のチューブ・プレートに移す
200bpまで取りたい場合は1:1の比率でAMPureXPを加える。400bp以上を取る場合は0.7:1、500bp以上を取る場合は0.65:1。この後さらに精製する予定がある場合は、エタノール洗浄は1回でもよい。