スピンカラムの再生の変更点

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{{category 実験プロトコル}}
*スピンカラムの再生
　使用済みのDNA抽出用スピンカラムを塩酸で処理することで再利用可能にする。
　使用済みのDNA抽出用スピンカラムを塩酸で処理することで再利用可能にする。出典は[Siddappa et al. (2007)|http://www.biotechniques.com/BiotechniquesJournal/2007/February/Regeneration-of-commercial-nucleic-acid-extraction-columns-without-the-risk-of-carryover-contamination/biotechniques-41235.html]。
*必要なもの
-50mL遠沈管 2本
-2mLチューブ 1本
-1M HCl 適量
-SPW 2500uL＋適量
-[[Buffer QBT]] 500uL
-SPW 適量
-2mLチューブ 1本 / column
-SPW 2500uL / column
-[[Buffer QBT]] 500uL / column
-使用済みスピンカラム(2mLチューブ用)
*手順
+50mL遠沈管にスピンカラムを入れ、1M HClをスピンカラムが水没するように注ぐ(気泡が残らないよう注意)
+最低4時間以上常温でインキュベートする(16時間以上を推奨)
+最低4時間以上常温でインキュベートする(16時間以上を推奨、ローテーターがあれば使用する)
+スピンカラムを取り出して別の50mL遠沈管に入れ、SPWをスピンカラムが水没するように注ぐ
+1分間程度転倒混和
+スピンカラムを2mLチューブにセットして、SPW 500uLを加える
+20℃6000×gで遠心して濾液を捨てる
+4回5に戻る
+[[Buffer QBT]] 500uLを加える
+20℃6000×gで遠心して濾液を捨てる