{{category 実験プロトコル}}

*必要なもの

-600ulチューブ 1本
-600ulチューブ 1本 or 8連チューブ 1/8本 /sample
-10x PCR Buffer 2ul /sample
-dNTPs Mixture 2ul /sample
-5〜10uM Primer 2ul x2 /sample
-SPW 10.8ul /sample
-TaKaRa rTaq 0.2ul /sample
-DNA template 1ul

*手順

+使用するチューブが入るチューブ立てを冷凍庫に入れておく
+600ulチューブに10x PCR Buffer 2ul、dNTPs Mixture 2ul、Primer 2ul x2、SPW 10.8ulをサンプル数+2(ネガコン+マージン)だけ入れる
+使用するチューブにDNA templateを1ul(ネガコンではSPW 1ul)入れておく (DNA templateをあらかじめ薄くしておいてピペットで取りやすい量入れてもよい。ただし1でSPWを減らすこと)
+2を1のチューブ立てに移してrTaq 0.2ulをサンプル数+2倍加える
+3を1のチューブ立てに移して4を19ulずつ加える
+必要ならミネラルオイルを一滴加える
+サーマルサイクラーにセットしてPCR
+アガロースゲル電気泳動でスクリーニング

　rTaq以外にもEx-TaqやLA-Taqなどがあるので適宜使い分けるべし。